Bse8 I

Название ферментаBse8 I
ПрототипBsaBI
Известные аналогиBsaBI, BseJI, MamI
АртикулSE-E147
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GATNN▼NNATC …3'
3'… CTANN▲NNTAG …5'
ИсточникBacillus species 8
Оптимальный буферSE-буфер G (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 50 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура60 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25100757550100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 60°С.
Чувствительность к метилированиюБлокируется Dam-метилированием при перекрывании (GmATC): 5’- GmATC N^NNATC-3’/3’- CTmAG N^NNTAG-5’. Блокируется (5mC)-метилированием при перекрывании: 5’-GATNN^NNAT(5mC)-3’/3’-(5mC)TANN^NNTAG-5’. Гидролизует полуметилированный сайт: 5’-GATNN^NNAT(5mC)-3’/3’-CTANN^NNTAG.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер G
ПримечанияПри более чем 5-кратном избытке фермента на 1 мкг ДНК наблюдается звездчатая активность.
Литература

Публикации не найдены.

// Код для некролога