BspAC I

Название фермента BspAC I
Прототип AciI
Известные аналоги AciI, SsiI
Артикул SE-E501
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… C▼CGC …3'
3'… GGC▲G …5'
Источник Bacillus species AC
Оптимальный буфер SE-буфер O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
10251007510100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM KH 2 PO 4 (pH 7.2); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 50% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер O, BSA
Примечания Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. М.В. Тарасова, З.К. Джанобилова, Ю.Э. Томилова, В.С. Дедков, В.А. Чернухин, С.Х. Дегтярев Новая сайт-специфическая эндонуклеаза BspACI из BACILLUS PSYCHRODURANS AC узнает последовательность 5`-C^CGC-3`/3`-GGC^G-5`. // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю.А.Овчинникова, Т5, №1, С. 16-24 (2009).
// Код для некролога