BstV1 I

Название ферментаBstV1 I
ПрототипBbvI
Известные аналогиBbvI, BseXI
АртикулSE-E303
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IISiФерменты типа IIS распознают асимметричные последовательности ДНК и разрезают за пределами сайта узнавания на фиксированном расстоянии. Широко используются в Golden Gate сборке.
Сайт узнавания
5'… GCAGC(N)8▼ …3'
3'… CGTCG(N)12▲ …5'
ИсточникBacillus stearothermophilus V1
Оптимальный буферSE-буфер G (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 50 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура55 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75100757575100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК pBR322 за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК pBR322
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 55°С
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер G.
ПримечанияПри 37°С активность 10% от максимальной.
Литература
  1. Неопубликованные данные Дедков В.С., Мурадов С.В., Шинкаренко Н.M., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (2001).
// Код для некролога