Sma I

Название фермента Sma I
Прототип SmaI
Известные аналоги Cfr9I, XmaCI, Xma I
Артикул SE-E177
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… CCC▼GGG …3'
3'… GGG▲CCC …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sma I из Serratia marcescens
Оптимальный буфер SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 25 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
000010050
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 25°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 20-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются высокоактивной T4 ДНК-лигазой в присутствии 10% ПЭГ и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка более эффективна.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 25°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo (E177T и E178T) прикладывается буфер 10x SE-Буфер Y. Turbo Sma I можно использовать как для быстрого гидролиза ДНК (в течение 15 мин), так и в стандартной реакции гидролиза в течение 1 ч.
Примечания
Литература

Публикации не найдены.
// Код для некролога