AspS9 I

Название фермента AspS9 I
Прототип Sau96I
Известные аналоги AsuI, Cfr13I, PspPI, Sau96I
Артикул SE-E117
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… G▼GNCC …3'
3'… CCNG▲G …5'
Источник Arthrobacter species S9
Оптимальный буфер SE-буфер W (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
5050751005075
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется при перекрывании dcm-метилированием (С m CWGG) GGN CC WGG.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечания
Литература
  1. В.С. Дедков Определение специфичности ДНК-метилтрансферазы M.AspS9I в клеточном лизате при помощи блокирования эндонуклеаз рестрикции // Биотехнология, № 4, С.30-39 (2009).
  4. Неопубликованные данные Дедков В.С., Килева E.В., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1995).
// Код для некролога