Fal I

Название фермента Fal I
Прототип FalI
Артикул SE-E153
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIBiФерменты типа IIB разрезают ДНК по обе стороны от сайта узнавания, обычно вырезая короткий фрагмент ДНК, содержащий этот сайт., Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… ▼(N)8AAGNNNNNCTT(N)13▼ …3'
3'… ▲(N)13TTCNNNNNGAA(N)8▲ …5'
Источник Flavobacterium aquatile Ob10
Оптимальный буфер SE-буфер W (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
025751005070
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 3-кратным избытком фермента 20% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка проходит лучше
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированию не проверялось
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W, SAM.
Примечания Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности. Для достижения 100% активности SAM следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 0.01 mM.
Литература
  2. Неопубликованные данные Дедков В.С., Синичкина С.А., Абдурашитов M.A., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (2001).
// Код для некролога