Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| ACCTGC(N)4 | ACCTGC(N)4↑ |
| TGGACG(N)8 | TGGACG(N)8↓ |
Источник: Acinetobacter calcoaceticus 36
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 25 | 25 | 50 | 50 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 3-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 4 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y
Примечание:
Избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Гончар Д.A., Шинкаренко Н.M., Дедков В.С., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные. 1999
