Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| YGGCCR | Y↑GGCCR |
| RCCGGY | RCCGG↓Y |
Источник: Из штамма E.coli, несущего клонированный ген Acol из Acinetobacter calcoaceticus
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 50 | 75 | 50 | 25 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол;200 µg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование: После гидролиза 3-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm-метилированием (CmCWGG):CCTGGCCR
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y
Литература:
Чернухин В.А., Беличенко О.А., Томилова Ю.Э., Дедков В.С., Дороганов А.О.. Неопубликованные данные (2006)
