Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| (N)7GAAGNNNNNNTAC(N)12 | ↑(N)7GAAGNNNNNNTAC(N)12↑ |
| (N)12CTTCNNNNNNATG(N)7 | ↓(N)12CTTCNNNNNNATG(N)7↓ |
Источник: Bacillus sphaericus
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага Т7
Оптимальный буфер: SE-буфер 2K
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 25 | 50 | 10 | 40 |
Условия хранения: 20 mM KH2PO4(pH 7.4); 100 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA, 7 mM2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер 2K.
Примечание:
Литература:
