Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| TCCGGA | T↑CCGGA |
| AGGCCT | AGGCC↓T |
Источник: Bacillus species 13
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-) за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (dam-)
Оптимальный буфер: SE-буфер 2K
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 25 | 50 | 75 | 50 | 5 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 50°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dam-метилированием (GmATC): TCCGGATC и GATCCGGA.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер 2K
Примечание:
Литература:
Дедков В.С., Речкунова Н.И., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные
