Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CCANNNNNNTGG | CCANNNNN↑NTGG |
| GGTNNNNNNACC | GGTN↓NNNNNACC |
Источник: Bacillus stearothermophilus X
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 10 | 100 | 75 | 25 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°C.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
Примечание:
Литература:
Wise, R., Schildkraut, I. Неопубликованные данные (1992)
