Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GATC | ↑GATC |
CTAG | CTAG↓ |
Источник: Kurthia zopfii 9
Прототип: Sau3A I
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
50 | 100 | 50 | 50 | 50 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 6 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Не блокируется при перекрывании Dam-метилированием, гидролизуется сайт GmATC, не гидролизует сайт GATmC
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G.
Литература:
Дегтярев С.Х., Речкунова Н.И., Гринев A.A., Дедков В.С., Изв. Сиб. Отд. Акад. Наук СССР 15: 25-26 (1989).
В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46
М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, В.А. Чернухин, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Метод рестрикционного анализа геномов млекопитающих in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с 29-38
А.Н. Надеев, В.А.Чернухин, О.О. Севастьянова, Ю.Э. Томилова, Н.М. Шинкаренко, А.А. Евдокимов, С.Х. Дегтярев BstKTI – новый dam-чувствительный неошизомер эндонуклеазы рестрикции MboI, способный гидролизовать полуметилированный субстрат // Биотехнология, 2006, №2, с. 5-10