Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| TTATAA | TTA↑TAA |
| AATATT | AAT↓ATT |
Источник: Paracoccus species 12
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг λ-ДНК в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y при 37оС за 1 час.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 50-75 | 75-100 | 10-25 | 25-50 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 200 мкг/мл BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин; Хранить при -20°С
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента около 50% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Литература:
- Д.А. Гончар, В.А. Чернухин, В.С. Дедков, Н.А. Михненкова, М.А. Абдурашитов, О.А. Беличенко, С.Х. Дегтярев. (2024) Эндонуклеаза рестрикции PecI из бактериального штамма Paracoccus species 12 узнает последовательность ДНК 5’-TTA^TAA-3’ и является изошизомером PsiI, ДНК-узнающие ферменты, том 2024(1)
