Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CCGCGG | CCGC↑GG |
| GGCGCC | GG↓CGCC |
Источник: Streptomyces fradiae 303
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 100 | 50 | 10 | 10 | 75 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Литература:
Пучкова Л.И., Селина A.В., Серов Г.Д., Кривопалова Г.Н., Речкунова Н.И., Дегтярев С.Х., Неопубликованные данные.
В. С. Дедков, С.Х. Дегтярев Определение эндонуклеаз рестрикции в колониях микроорганизмов Streptomyces и Nocardia // Прикладная биохимия и микробиология Том 28, 1992, №. 2, 309- 313
