Описание
Расщепляет все формы ДНК и РНК (одноцепочечные, двуцепочечные, линейные и кольцевые) до олигонуклеотидов длиной 3-5 нуклеотидных остатка с 5`-фосфатом на конце. Фермент активен в диапазоне значений pH от 7,5 до 8,5 и диапазоне температур от 20 до 37°С.
Применение:
– расщепление природных или денатурированных нагреванием ДНК и РНК;
– уменьшение вязкости образцов при очистке белков;
– удаление нуклеиновых кислот из клеточных или бактериальных лизатов.
Источник:
Выделена из штамма E.coli, несущего клонированный ген Sma-нуклеазы из Serratia marcescens.
Условия хранения:
50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM NaCl,
5 mM MgCl2, 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Определение активности:
Олигонуклеотидный дуплекс
5′-AGCAAATATTGCTCGATATC-3′
3′-TCGTTTATAACGAGCTATAG-5′
Единица активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг олигонуклеотидного дуплекса указанной структуры за 30 мин при 37°С в SE-буфере B в 20 мкл реакционной смеси.
Условия реакции и определения активности:
1 x SEBuffer B. Инкубировать при 37°C.
Чистота: >90% (SDS-PAGE)
Температурная инактивация: Фермент не инактивируется прогреванием при 65-80°С в течение 20 минут.
Состав прилагаемого буфера:
1 x SEBuffer B (pH 7.6 @ 25ºC)
10 mМ Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT
