Описание
Источник: Из штамма E.coli, несущего рекомбинантный ген
Описание:
Урацил-ДНК-гликозилаза катализирует высвобождение свободного урацила из урацил-содержащих ДНК. UDG эффективно гидролизует урацил из одно- и двуцепочечных ДНК, но не из олигомеров (6 или менее оснований)
Определение единицы активности:
За одну единицу активности принимали количество фермента, необходимое для высвобождения 60 пмолей урацила за 1 мин из двуцепочечной урацил-содержащей ДНК при 37°С. Активность измеряется по высвобождению меченого[3Н]–урацила в 50 мкл рекционной смеси, содержащей 0,2 мкг ДНК (8.7 х 104cpm/μg) за 30 мин при 37°С.
Оптимальный буфер: SE-буфер Урацил ДНК гликозилаза
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 50 mM NaCl; 1 mM EDTA; 1mM DTT; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
С ферментом поставляется: 10X буфер для UDG.
Примечание:
УДГ термостабильна и не инактивируется прогреванием при 65 или 80°C.
Прогревание при 95°C в течение 10 мин приводит только к 95% инактивации фермента (остаточная активность не менее 5%). Поэтому после прогрева реакционной смеси с УДГ рекомендуется дополнительная экстракция ДНК фенолом/хлороформом или очистка на спин-колонке.
