Acs I

Название ферментаAcs I
ПрототипApoI
Известные аналогиApoI, XapI
АртикулSE-E013
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… R▼AATTY …3'
3'… YTTAA▲R …5'
ИсточникArthrobacter citreus
Оптимальный буферSE-буфер W (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура50 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25505010010100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°C.
ЛигированиеПосле гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 50°C.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер W, BSA Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
ПримечанияДля достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  2. S.Kh. Degtyarev, A.A. Kolyhalov, N.I. Rechkunova, I.I. Tepavicharova, L.I. Mechandjiska, E.I. Builieva Acs I, a new restriction endonuclease from Arthrobacter citreus 310 recognizing 5′-Pu^AATTPy-3′. // Nucleic Acids Research, Vol. 20, No.14 (1992). (На английском)
// Код для некролога