Ale I
| Название фермента | Ale I | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Прототип | OliI | ||||||||||||
| Артикул | SE-E567 | ||||||||||||
| Вариант Turbo | Отсутствует | ||||||||||||
| Высококонцентрированная версия | Отсутствует | ||||||||||||
| Тип рестриктазы | Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания. | ||||||||||||
| Сайт узнавания | 5'… CACNN▼NNGTG …3' 3'… GTGNN▲NNCAC …5' | ||||||||||||
| Источник | Aureobacterium liquefaciens | ||||||||||||
| Оптимальный буфер | SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) | ||||||||||||
| Оптимальная температура | 37 °C | ||||||||||||
| Температура инактивации | 65 °C | ||||||||||||
| Активность в буферах |
| ||||||||||||
| Определение единицы активности | За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг λ-ДНК в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y при 37 С за 1 час. | ||||||||||||
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда | ||||||||||||
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.6), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 100 мкг/мл BSA, 1 mM DTT, 50% глицерин; Хранить при 20°С | ||||||||||||
| Лигирование | После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и более 95% из них могут быть повторно расщеплены. | ||||||||||||
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед. фермента в течение 16 часов при 37 С. | ||||||||||||
| Чувствительность к метилированию | Блокируется при перекрывании CG-метилированием | ||||||||||||
| С ферментом поставляется | 10 Х SE-буфер Y | ||||||||||||
| Литература | Публикации не найдены. |