Bgl I

Название ферментаBgl I
ПрототипBglI
АртикулSE-E025
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GCCNNNN▼NGGC …3'
3'… CGGN▲NNNNCCG …5'
ИсточникBacillus globigii
Оптимальный буферSE-буфер 2W (20 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 200 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
505007525100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
ЛигированиеПосле гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°C. Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности
Чувствительность к метилированиюНе блокируется dсm-метилированием при перекрывании (C m CWGG): G CCWGG NNGGC
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер 2W. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
ПримечанияИзбыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература
  1. Сторонняя публикация Duncan, C.H., Wilson, G.A. and Young, F.E. J. Bacteriol. 134: 338 (1978).
// Код для некролога