Неопубликованные данные
Неопубликованные данные
Bsp13 I
| Название фермента | Bsp13 I | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Прототип | BspMII | ||||||||||||
| Известные аналоги | AccIII, Aor13HI, BlfI, BseAI, BspEI, BspMII, Kpn2I, MroI | ||||||||||||
| Артикул | SE-E183 | ||||||||||||
| Вариант Turbo | Отсутствует | ||||||||||||
| Высококонцентрированная версия | Отсутствует | ||||||||||||
| Тип рестриктазы | Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания. | ||||||||||||
| Сайт узнавания | 5'… T▼CCGGA …3' 3'… AGGCC▲T …5' | ||||||||||||
| Источник | Bacillus species 13 | ||||||||||||
| Оптимальный буфер | SE-буфер 2K (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 200 mM KCl; 1 mM DTT.) | ||||||||||||
| Оптимальная температура | 50 °C | ||||||||||||
| Температура инактивации | 65 °C | ||||||||||||
| Активность в буферах |
| ||||||||||||
| Определение единицы активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-) за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси. | ||||||||||||
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда (dam-) | ||||||||||||
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. | ||||||||||||
| Лигирование | После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. | ||||||||||||
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 50°С. | ||||||||||||
| Чувствительность к метилированию | Блокируется при перекрывании dam-метилированием (G m ATC) TCCG GA TC и GA TC CGGA. | ||||||||||||
| С ферментом поставляется | 10 Х SE-буфер 2K | ||||||||||||
| Литература |