Bst2U I

После гидролиза 2-кратным избытком фермента
Название ферментаBst2U I
ПрототипBstNI
Известные аналогиBptI, BseBI, BstNI, BstOI, MvaI, Ajn I, EcoRII, Psp6 I, PspGI
АртикулSE-E051
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… CC▼WGG …3'
3'… GGW▲CC …5'
ИсточникBacillus stearothermophilus 2U
Оптимальный буферSE-буфер G (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 50 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура60 °C
Температура инактивациине инактивируется
Активность в буферах
BGOWYROSE
7510050501050
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
ЛигированиеПосле гидролиза 2-кратным избытком фермента
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 60°C.
Чувствительность к метилированиюНе блокируется при перекрывании Dcm-метилированием (C m CWGG) CCWGG.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер G, BSA
ПримечанияДля достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Неопубликованные данные Мякишева Т.В., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1995).
// Код для некролога