CciN I

Название фермента CciN I
Прототип NotI
Известные аналоги NotI
Артикул SE-E203
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GC▼GGCCGC …3'
3'… CGCCGG▲CG …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген CciN I из Curtobacterium citreus N.
Оптимальный буфер SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25507575100100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности Плазмидная ДНК pUC-AD
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo (E203T и E204T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечания
Литература
  1. V.S. Dedkov, N.I. Rechkunova, E.A. Prihodko, E.V. Kileva, Y.S. Kusner, V.A. Verchozina, S.Kh. Degtyarev CciNI, an isoschisomer of NotI from Curtobacterium citreum recognizes 5′-GC^GGCCGC-3′. // Gene, No. 157, 99-100 (1995). (На английском)
  3. В.Е. Репин, С.Х. Дегтярев, Н.Н. Карпышев, В.Е. Чижиков Фрагмент нуклеиновой кислоты для тестирования крупнощепящих рестриктаз SfiI и NotI и рекомбинантная плазмидная ДНК pDKR 85 для тестирования крупнощепящих рестриктаз SfiI и NotI. // Авторское свидетельство SU 1433020 (1986).
// Код для некролога