CciN I

Название ферментаCciN I
ПрототипNotI
Известные аналогиNotI
АртикулSE-E203
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GC▼GGCCGC …3'
3'… CGCCGG▲CG …5'
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген CciN I из Curtobacterium citreus N.
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25507575100100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиПлазмидная ДНК pUC-AD
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента около 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюБлокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo (E203T и E204T) прикладывается только буфер ROSE.
Литература
  1. V.S. Dedkov, N.I. Rechkunova, E.A. Prihodko, E.V. Kileva, Y.S. Kusner, V.A. Verchozina, S.Kh. Degtyarev CciNI, an isoschisomer of NotI from Curtobacterium citreum recognizes 5′-GC^GGCCGC-3′. // Gene, No. 157, 99-100 (1995). (На английском)
  3. В.Е. Репин, С.Х. Дегтярев, Н.Н. Карпышев, В.Е. Чижиков Фрагмент нуклеиновой кислоты для тестирования крупнощепящих рестриктаз SfiI и NotI и рекомбинантная плазмидная ДНК pDKR 85 для тестирования крупнощепящих рестриктаз SfiI и NotI. // Авторское свидетельство SU 1433020 (1986).
// Код для некролога