Dri I

Название ферментаDri I
ПрототипEam1105I
Известные аналогиAhdI, AspEI, Eam1105I, EclHKI
АртикулSE-E193
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GACNNN▼NNGTC …3'
3'… CTGNN▲NNNCAG …5'
ИсточникDeinococcus radiodurans EA
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
7575101010040
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента около 5% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой. Сшивка лучше в присутствии 10% ПЭГ.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Литература
  1. Неопубликованные данные Abdurashitov, M.A., Nayakshina, T.N., Dedkov, V.S., Popichenko, D.V., Degtyarev, S.K Unpublished observations (2003)
// Код для некролога