Pse31 I

Название ферментаPse31 I
ПрототипEco31I
Известные аналогиEco31I
АртикулSE-E603
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Сайт узнавания
5'… GGTCTC(N)1▼ …3'
3'… CCAGAG(N)5▲ …5'
ИсточникPeribacillus species 31
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25-5075-10010-2525-5010075
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг T7-ДНК в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y при 37°С за 1 час.
Субстрат для определения активностиT7-ДНК
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 200 мкг/мл BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин; Хранить при -20°С
ЛигированиеПосле гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и около 90% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Чувствительность к метилированиюБлокируется на 90-95% при перекрывании mCG метилированием: 5'-GGTCT(5mC)G-3' и/или 5'-GAGAC(5mC)G-3'.
С ферментом поставляется10 x SE-Буфер Y, BSA (10 мг/мл). Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Литература
  1. В.А. Чернухин, В.С. Дедков, Н.А. Михненкова, Н.А. Воронцова, М.А. Абдурашитов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Эндонуклеаза рестрикции Pse31I из штамма бактерии Peribacillus species 31, изошизомер Eco31I, узнает непалиндромную последовательность ДНК 5’-GGTCTC-3’ (1/5) // ДНК-узнающие ферменты, том 2025(1), DOI: 10.26213/3034-4301.2025.4.1.001 (2025).
// Код для некролога