PspN4 I

Название фермента PspN4 I
Прототип NlaIV
Известные аналоги BspLI, NlaIV
Артикул SE-E089
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GGN▼NCC …3'
3'… CCN▲NGG …5'
Источник Pseudomonas species N4
Оптимальный буфер SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
1010102510050
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется метилированием 5`- GGNN(5mC)C - 3`/3`- C(5mC)NNGG - 5` и 5`- GGNN(5mC)С - 3`/3`- CCNNGG - 5`
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечания
Литература
  1. В.А. Чернухин, Н.А. Михненкова, Е.Н. Ломаковская, Н.М. Шинкаренко, В.С. Дедков, С.Х. Дегтярёв Новая сайт-специфическая эндонуклеаза рестрикции BpuN4I узнает и расщепляет последовательность ДНК 5`-G^GNNCC- 3`. // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, Т. 9 , № 2 ,с. 5-8 (2013).
  3. Неопубликованные данные Абдурашитов M.A., Килева E.В., Шевченко A.В., Дедков В.С., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1995).
// Код для некролога