Tth111 I

Название ферментаTth111 I
ПрототипTth111I
Известные аналогиAspI, PflFI, PsyI, TelI
АртикулSE-E097
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GACN▼NNGTC …3'
3'… CTGNN▲NCAG …5'
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген Tth111 I из Thermus Thermophilus 111
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура65 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75501010100100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 500 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 2-кратным избытком фермента 10% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 65°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y.
ПримечанияБольшой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература
  1. Сторонняя публикация Shinomiya, T., Sato, S. Nucleic Acids Res. 8: 43-56 (1980).
// Код для некролога