Bse8 I

Название фермента Bse8 I
Прототип BsaBI
Известные аналоги BsaBI, BseJI, MamI
Артикул SE-E147
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GATNN▼NNATC …3'
3'… CTANN▲NNTAG …5'
Источник Bacillus species 8
Оптимальный буфер SE-буфер G (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 50 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 60 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25100757550100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 60°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется Dam-метилированием при перекрывании (GmATC): 5’- GmATC N^NNATC-3’/3’- CTmAG N^NNTAG-5’. Блокируется (5mC)-метилированием при перекрывании: 5’-GATNN^NNAT(5mC)-3’/3’-(5mC)TANN^NNTAG-5’. Гидролизует полуметилированный сайт: 5’-GATNN^NNAT(5mC)-3’/3’-CTANN^NNTAG.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер G
Примечания При более чем 5-кратном избытке фермента на 1 мкг ДНК наблюдается звездчатая активность.
Литература

Публикации не найдены.
// Код для некролога