Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CACNNNNGTG | CACNN↓NNGTG |
| GTGNNNNCAC | GTGNN↓NNCAC |
Источник: Aureobacterium liquefaciens
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг λ-ДНК в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y при 37 С за 1 час.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10-25 | 10-25 | 0-10 | 10-25 | 100 | 50-75 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.6), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 100 мкг/мл BSA, 1 mM DTT, 50% глицерин; Хранить при 20°С
Лигирование:
После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и более 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед. фермента в течение 16 часов при 37 С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании CG-метилированием
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y
Примечание:
Литература:
