Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GCNNNNNNNGC | GCNNNNN↑NNGC |
| CGNNNNNNNCG | CGNN↓NNNNNCG |
Источник: Bacillus stearothermophilus MW
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 25 | 25 | 50 | 100 | 40 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C. Для периода более 7 дней рекомендуется хранить при -70°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 55°C.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Примечание:
При 37°С активность – 20% от максимальной.
Литература:
Надеев A.Н., Дедков В.С., Томилова Ю.Э., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2002).
