Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GTGCAC | G↑TGCAC |
| CACGTG | CACGT↓G |
Источник: Vibrio nereis 18
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер O.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 25 | 100 | 25 | 25 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
Примечание:
Литература:
Дегтярев С.Х., Речкунова Н.И., Нетесова Н.A., Чижиков В.E., Малыгин E.Г., Кочкин A.В., Михайлов В.В., Рассказов В.A. Биоорг. Хим. 13: 422-423 (1987).
