Описание
Сайт узнавания:
| AG↑CT |
| TC↓GA |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Alu I изArthrobacter luteus
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75 | 75 | 10 | 50 | 100 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 1 mM DTT, 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента примерног 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 4 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo (E015T и E016T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание:
Литература:
Roberts, R.J., Myers, P.A., Morrison, A., Murray, K. J. Mol.Biol. 102: 157-165 (1976).
Дегтярев С.Х., Колыхалов А.А., Речкунова Н.И., Дедков В.С., Жилкин П.А. BsiI — новая необычная эндонуклеаза рестрикции. // Молекулярная биология, т.24, Вып. 1, 244-247 (1990).
Репин В.Е., Польшина С.В., Божко Н.А., Дегтярев С.Х. Культивирование Bacillus species 21 — продуцента эндонуклеазы рестрикции Bse21I. // Извести СО АН СССР, Серия биологических наук, вып.1, 108-111 (1989).
Дедков В.С., Дегтярев С.Х., Речкунова Н.И., Серов Г.Д., Пучкова Л.И., Вайткявичус Д.П., Кюдулене Э.-Л.Ю., Янулайтис Э.-А.А. Штамм бактерий Staphilococcus saprophyticus продуцент сайт-специфической эндонуклеазы рестрикции SsrI. // Авторское свидетельство SU 1486512 (1989).
Дегтярев С.Х., Репин В.Е., Речкунова Н.И., Шевченко Л.С., Иванова Е.П., Рассказов В.А. Штамм бактерий Bacillus species 21 — продуцент сайт-специфической эндонуклеазы Bse21I. // Авторское свидетельство SU 1518372 (1989).
