Описание
Сайт узнавания:
| GCTAG↑C |
| C↓GATCG |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Bmt I из Bacillus megaterium S2
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (Hind III-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер W
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 50 | 50 | 100 | 75 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
Примечание:
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W
Литература:
Дедков В.С., Наякшина Т.Н., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Биотехнология, №1, С. 11-15 (2003).
__rus47
