Описание
Сайт узнавания:
GG↑CC |
CC↓GG |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген HaeIII из Haemophilus aegyptius
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
75 | 100 | 25 | 50 | 50 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется метилированием: 5`-GG(5mC)C-3`/ 3`-C(5mC)GG-5`.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечание:
Литература:
Middleton, J.H., Edgell, M.H., Hutchison, C.A. J. Virol. 10:42-50 (1972).
Дедков В.С., Дегтярев С.Х., Речкунова Н.И., Серов Г.Д., Пучкова Л.И., Вайткявичус Д.П., Кюдулене Э.-Л.Ю., Янулайтис Э.-А.А. Штамм бактерий Staphilococcus saprophyticus продуцент сайт-специфической эндонуклеазы рестрикции SsrI. // Авторское свидетельство SU 1486512 (1989).
Бойков Ю.Н., Репин В.Е., Дегтярев С.Х., Виестуре В.А., Стенгревицс О.А. Штамм бактерий Providencia stuartii — продуцент рестриктазы PstI. // Авторское свидетельство SU 1472493 (1989).