Описание
Применение:
Предназначен для изучения метилирования ДНК. Позволяет определить наличие сайтов R(5mC)GY в заданной точке ДНК человека. Набор рассчитан на 200 реакций. Включает 1, 3 или 5 гибридных праймеров по выбору заказчика, либо полный набор из 32 гибридных праймеров (HP).
Состав:
1. 1X TE буфер – 200 мкл
2. 10Х SE TMN Буфер – 160 мкл
3. ДМСО – 80 мкл
4. БСА, 10 мг/мл – 70 мкл
5. MD-эндонуклеаза (20 е.а./мкл) – 10 мкл
6. Универсальный адаптер, двухцепочечный (10 μM) – 110 мкл
7. АТФ, 10 mM – 110 мкл
8. Т4 ДНК лигаза (200 е.а./мкл) – 100 мкл
9. 10X SE GLAD буфер – 430 мкл
10. MgCl2, 50 mM – 120 мкл
11. Смесь dNTP, 10 mM каждый – 90 мкл
12. SP Taq ДНК Полимераза, 5 е.а./мкл – 40 мкл
13. Контрольная ДНК Raji, 18 нг/мкл – 10 мкл
14. Контрольная ДНК HeLa, 18 нг/мкл – 10 мкл
15. Контрольная ДНК фага Lambda, 18 нг/мкл – 25 мкл
16. Контрольня смесь для URB1 (праймеры и флюоресцентный зонд), 10 μM каждый – 40 мкл
17. Контрольня смесь для CEBPD (праймеры и флюоресцентный зонд), 10 μM каждый – 15 мкл
18. В состав включены 1, 3 или 5 гибридных праймеров по выбору заказчика, либо полный набор из 32 гибридных праймеров в концентрации 20 μM и количестве 170 мкл каждый.
Последовательности 32 гибридных праймеров приведены в Инструкции по применению
Условия хранения: Хранить при -20°C
Примечание:
Для проведения GLAD ПЦР анализа в реакционную смесь на стадии ПЦР необходимо добавить геномный праймер, зонд, а также один из гибридных праймеров.
Геномный праймер и зонд могут быть синтезированы по дополнительному заказу.
Литература:
1. A.G. Akishev et al.”GLAD-PCR assay of selected R(5mC)GY sites in URB1 and CEPBD genes in human genome” // Res J Pharm Biol Chem Sci, 8(1), 2017
2.GLAD-PCR Assay of DNA Methylation Markers Associated with Colorectal Cancer // Evdokimov et al.,Biol Med (Aligarh) 2016, 8:7
3.Инструкция по применению набора для GLAD-ПЦР-анализа
4.Демонстрация GLAD-ПЦР-анализа на контрольных ДНК
