Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GAGCGG | GAG↑CGG |
| CTCGCC | CTC↓GCC |
Источник: Acinetobacter calcoaceticus BS
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75 | 75 | 25 | 25 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 50% могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечание:
Литература:
Абдурашитов М.А., Килева E.В., Мякишева T.В., Дедков В.С., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х., Прикл. Биохим. Микробиол., 5(33): 556-558 (1997).
М. А. Абдурашитов, Е. В. Килева, Т. В. Мякишева, В. С. Дедков, А. В. Шевченко, С. X. Дегтярев AccBSI – новая эндонуклеаза рестрикции из Acinetobacter calcoaceticus BS // Прикладная Биохимия и Микробиология, 1997, том 33, № 5, с 556-558
