Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GCGCGC | G↑CGCGC |
| CGCGCG | CGCGC↓G |
Источник: Bacillus stearothermophilus P
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 50 | 100 | 75 | 50 | 50 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 10 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 50°C.
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G
Примечание:
Литература:
Langdale, J.A., Myers, P.A., Roberts, R.J. Unpublished observations (1992).
