Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCTNAGC | GC↑TNAGC |
CGANTCG | CGANT↓CG |
Источник: Bacillus species 1720
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
50 | 100 | 50 | 50 | 75 | 75 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК лигазой и около 95% из них могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специффического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G
Примечание:
Литература:
Degtyarev, S.Kh., Kolyhalov, A.A., Rechkunova, N.T., Tepavicharova, I.I., Mechandjiska, L.I., Builieva, E.I. Nucleic Acids Res. 19: 2504 (1991).