Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CCWWGG | C↑CWWGG |
| GGWWCC | GGWWC↓C |
Источник: Bacillus stearothermophilus T1
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер 2K
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 25 | 25 | 75 | 10 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 60°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер 2K
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности
Литература:
Серов Г.Д., Терещенко T.A., Пучкова Л.И., Речкунова Н.И., Дегтярев С.Х., Неопубликованные данные.
