Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CCTNNNNNAGG | CCTNN↑NNNAGG |
| GGANNNNNTCC | GGANNN↓NNTCC |
Источник: Bacillus stearothermophillus EN
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 50 | 50 | 25 | 25 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермена около 60% фрагментов сшиваются ДНК лигазой и около 90% из них могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 65°С
Чувствительность к метилированию: Не блокируется dсm-метилированием при перекрывании (CmCWGG): CCTGGNNNAGG или CCTNNNCCAGGС ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y
Примечание:
Литература:
Абдурашитов M.A., Дедков В.С., Килева E.В., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2000).
