Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| TACGTA | TAC↑GTA |
| ATGCAT | ATG↓CAT |
Источник: Bacillus stearothermophilus SN
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага T7
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 100 | 50 | 10 | 50 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при 20°C.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 70% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°C.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Мякишева T.В., Дедков В.С., Килева E.В., Абдурашитов M.A., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные(1995).
