Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GCGGCCGC | GC↑GGCCGC |
| CGCCGGCG | CGCCGG↓CG |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген CciN I из Curtobacterium citreus N.
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
Плазмидная ДНК pUC-AD
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 25 | 50 | 75 | 75 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo (E203T и E204T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание:Литература:
Verchozina, V.A., Degtyarev, S.Kh. Gene 157: 99-100 (1995).
