Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CCCGC(N)4 | CCCGC(N)4↑ |
GGGCG(N)6 | GGGCG(N)6↓ |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Fau I из Flavobacterium aquatili
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
100 | 25 | 50 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 2-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 55°С
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Литература:
Дегтярев С.Х., Колыхалов A.A., Речкунова Н.И., Дедков В.С. Биоорг. Хим. 15: 130-132 (1989).
Абдурашитов М.А., Охапкина С.С., Нетесова Н.А., Голикова Л.Н., Гончар Д. А., Дегтярев С.Х. Уникальная система рестрикции-модификации FauI: клонирование и сравнительный анализ структуры белков.// Молекулярная биология, т. 37, № 4, с. 619-624 (2003).