Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GGCGCC | GG↑CGCC |
| CCGCGG | CCGC↓GG |
Источник: Micrococcus lylae 113
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага Т7
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 100 | 25 | 10 | 10 | 50 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Дедков В.С., Зернов Ю.П., Речкунова Н.И., Дегтярев С.Х. Мол. Генет. Микробиол. Вирусол. 12: 17-18 (1990).
Сосновцев С.В., Дедков В.С., Речкунова Н.И., Зернов Ю.П., Дегтярев С.Х. Определение субстратной специфичности эндонуклеазы рестрикции Mly113I . // Сибирский биологический журнал, Вып.2, 66-67 (1991).
