Описание
Применение:
Предназначен для изучения метилирования ДНК. Позволяет определить наличие неметилированных сайтов RCGY в заданном регионе генома. Рассчитан на проведение 200 реакций GlaI-ПЦР.
Инструкция по применению набора.
Состав:
1. 1X TE буфер
2. 10Х SE TMN Буфер
3. БСА, 10 мг/мл
4. MD-эндонуклеаза (20 е.а./мкл)
5. β-меркаптоэтанол (200 мМ)
6. 10X SE GLAD буфер
7. Смесь 4х dNTP, 10 mM каждый
8. SP Taq ДНК Полимераза, 5 е.а./мкл
9. Контрольная ДНК L68, 18 нг/мкл
10. Контрольная ДНК HeLa, 18 нг/мкл
11. Контрольная ДНК мыши, 18 нг/мкл
12. ДНК фага λ, 18 нг/мкл
13. ДНК Raji, 18 нг/мкл
12. Контрольная смесь RARb (праймеры и флюоресцентный зонд), 10 μM каждый
Условия хранения:
Хранить при -20°C
Примечание:
При проведения GlaI-ПЦР анализа в реакционную смесь на стадии ПЦР необходимо добавить геномные праймеры и зонд, рассчитанные для заданной области в ДНК. Геномные праймеры и зонд могут быть синтезированы по дополнительному заказу. Набор также включает все реагенты, необходимые для проведения контрольных экспериментов Анализ проводится менее чем за 3 часа.
Литература:
1. EV Dubinin, AG Akishev, MA Abdurashitov, SB Oleynikova, VL Sitko, and S Kh Degtyarev. Real time GlaI-PCR assay of regulation regions of human genes HDAC4, RARB and URB1// Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences, vol 7(2), p.p. 667-676 (2016).
2 А.Г. Акишев, Д.А. Гончар, М.А. Абдурашитов, С.Х. Дегтярев. Эпигенетическое типирование малигнантных клеточных линий человека с помощью BlsI- и GlaI ПЦР анализа. // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, Т. 7 , № 3 ,с. 5-16 (2011)
3. Гончар Д.А., Акишев А.Г., Дегтярев С.Х. BlsI- и GlaI- ПЦР анализ – новый метод исследования метилированных участков ДНК. // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, Т. 6 , № 1 ,с. 5-12 (2010)
4. А.Г. Акишев, Н.А. Нетесова, М.А. Абдурашитов, И.В. Вихлянов, М.К. Никитин, А.Б. Карпов, С.Х. Дегтярев GlaI-ПЦР анализ метилирования сайта ACGC в хp11: 65647266 в препаратах ДНК клеток крови в норме и на раннихстадиях рака молочной железы // Эпигенетическая ДНК диагностика, DOI: 10.26213/SE.2019.66.12.001 (2019)
