Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCTCTTCN | GCTCTTCN↑ |
CGAGAAG(N)4 | CGAGAAG(N)4↓ |
Источник: Planococcus citreus S
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
100 | 50 | 75 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 3-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются Т4 ДНК-лигазой и около 95% из них могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 0.5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Литература:
Чернухин В.А, Килева Е.В., Томилова Ю.Э., Дедков В.С. Неопубликованные данные (2006).