Psi I

Эндонуклеаза рестрикции Psi I
Имеется истинный изошизомер с большей активностью

  • Сайт узнавания: TTA↑TAA / AAT↓ATT
  • Источник: Pseudomonas species SE-G49
  • Оптимальный буфер: SE-буфер B
  • Оптимальная температура: 37
  • Температура инактивации, 20 мин при: 65

Description

Имеется истинный изошизомер с большей активностью Эндонуклеаза рестрикции Pec I

Сайт узнавания и позиция гидролиза:

TTATAA TTA↑TAA
AATATT AAT↓ATT

Источник: Pseudomonas species SE-G49
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:

B G O W Y ROSE
100 25-50 10-25 25-50 75-100 40

Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 50% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечание:
Литература:

  1. Абдурашитов M.A., Беличенко O.A., Лебедева Н.A., Дегтярев С.Х. Биохимия 64: 574-576 (1999).
  2. Д.А. Гончар, В.А. Чернухин, В.С. Дедков, Н.А. Михненкова, М.А. Абдурашитов, О.А. Беличенко, С.Х. Дегтярев. (2024) Эндонуклеаза рестрикции PecI из бактериального штамма Paracoccus species 12 узнает последовательность ДНК 5’-TTA^TAA-3’ и является изошизомером PsiI, ДНК-узнающие ферменты, том 2024(1)