Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GGGCCC | G↑GGCCC |
CCCGGG | CCCGG↓G |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген PspOM I из Pseudomonas species OM2164
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (BamHI-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (BamHI-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
75 | 10 | 100 | 25 |
Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Примечание:
Литература:
Беличенко O.A., Шевченко A.В., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (1994).