Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GACGTC | GAC↑GTC |
| CTGCAG | CTG↓CAG |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Zra I из Zoogloea ramigera11
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 100 | 50 | 25 | 25 | 75 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка проходит лучше.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Дедков В.С., Синичкина С.А., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Биотехнология №6: 3-7 (2001)
В. С. Дедков, С. А. Синичкина, Д. В. Попиченко, С. X. Дегтярёв Эндонуклеаза рестрикции ZraI из Zoogloea ramigera 11 узнает 5′-GAC↓GTC-3′ // Биотехнология, 2001, № 6, c 3-7
