Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CCTCGAGG | CC↑TCGAGG |
| GGAGCTCC | GGAGCT↓CC |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Abs Iиз Arthrobacter species 7М06.
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг ДНК pUC19SE/DriI в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере AbsI при 37°С за 1 час
Субстрат для определения активности:
pUC19SE/DriI
Оптимальный буфер: SE-буфер AbsI
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10-25 | 10-25 | 0-10 | 25-50 | 10-25 | 25 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 200 мкг/мл BSA, 0.05% Triton X-100, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер AbsI
Примечание:
Длительная инкубация может привести к появлению звездчатой активности.
Литература:
В.А. Чернухин, Ю.Г. Каширина, Ю.Э. Томилова, Д.А. Гончар, В.С. Дедков, Н.А. Михненкова, С.Х. Дегтярев. Новая сайт-специфическая эндонуклеаза AbsI из Arthrobacter species 7М06 узнает октануклеотидную палиндромную последовательность ДНК 5’-CC^TCGAGG-3’ // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №2, с. 29-34
