Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| AGCGCT | AGC↑GCT |
| TCGCGA | TCG↓CGA |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Afe I из Alcaligenes faecalis T2774
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (BamHI-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (BamHI-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 25 | 75 | 75 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 80% фрагментов ДНК pBR322 сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечание:
Литература:
Абдурашитов M.A., Килева E.В., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные. (1994)
